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HepG2 人肝癌細胞
HepG2 人肝癌細胞
Hep G2人肝癌細胞
細胞株名稱:Hep G2人肝癌細胞 種屬:人 組織來源:肝細胞癌 生長特性:貼壁生長 形態特征:上皮細胞 | |
培養條件: | 完全培養基:90%DMEM(高糖)+10%胎牛血清 |
傳代方法: | 收到細胞后,取出培養瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。 |
凍存方法: | 凍存液:90%完全培養液,10%DMSO |
一.培養基及培養凍存條件準備:
1) 準備MEM培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
培養注意事項:1. hepg2細胞復蘇或傳代后會有少部分的細胞貼壁和部分懸浮的細胞,復蘇兩天后細胞會從貼壁細胞向外開始生長,有時細胞再生長過程中,細胞會再貼壁細胞的上方生長,形成不同的細胞層,這種情況會有發生。 在細胞復蘇的一周內,培養瓶中 通常會有懸浮的活的細胞團,在換液過程中不要丟棄在這些活的懸浮細胞,可以通過離心(125×g)回收細胞,重新打回到培養瓶中,分離或者丟棄漂浮的活細胞會使細胞數量變少,引起細胞的停滯生長或細胞死亡。
2.培養條件的細微變化,尤其是pH和培養基中血清的質量,可能會影響細胞的生長狀況,在細胞的生長過程中會有細胞內的液泡出現,特別在細胞快要融合是會出現這種情況。培養細胞時使用未被滅活的高質量、低內毒素的胎牛血清,可以使細胞更好的貼壁和形成單層細胞。
3. 細胞在生長過程中可以通過將血清濃度提到到20%來改善細胞生長緩慢的情況。(參考atcc 有關該細胞的描述)
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配